在神經(jīng)科學(xué)和心理學(xué)研究中，小鼠的社交行為是探索自閉癥、精神分裂癥、焦慮癥等病疾機(jī)制的重要切入點(diǎn)。三箱社交實(shí)驗(yàn)（Three-Chamber Social Test）作為經(jīng)典的行為學(xué)范式，通過(guò)模擬小鼠對(duì)“陌生個(gè)體”與“非生命物體”的選擇偏好，定量評(píng)估其社交能力與社交新穎性認(rèn)知。以下系統(tǒng)地解析該實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)原理、操作流程及關(guān)鍵注意事項(xiàng)，為科研工作者和愛(ài)好者提供實(shí)用指南。

一、應(yīng)用領(lǐng)域：從病疾模型到藥wu篩選

三箱社交實(shí)驗(yàn)廣泛應(yīng)用于以下研究方向： 

1. 自閉癥譜系障礙（ASD）研究 

通過(guò)敲除SHANK3、NLGN3等基因構(gòu)建自閉癥模型小鼠，檢測(cè)其社交互動(dòng)缺陷。 

2. 精神分裂癥機(jī)制探索 

評(píng)估NMDA受體拮抗劑誘導(dǎo)的社交退縮行為。 

3. 抗焦慮/抑郁藥wu開(kāi)發(fā) 

分析藥wu干預(yù)后小鼠對(duì)陌生同類的探究意愿變化。 

4. 社交記憶研究 

引入“熟悉鼠”與“陌生鼠”對(duì)比，測(cè)試小鼠的社交新穎性識(shí)別能力。 

5. 環(huán)境因素影響評(píng)估 

如孕期壓力、重金屬暴露等對(duì)子代社交行為的影響。

二、實(shí)驗(yàn)原理：行為選擇的量化邏輯 

實(shí)驗(yàn)基于小鼠的天然行為特征： 

- 探索本能：小鼠傾向于探索新環(huán)境或新個(gè)體； 

- 社交偏好：正常小鼠會(huì)選擇與同類互動(dòng)而非無(wú)生命物體； 

- 新穎性驅(qū)動(dòng)：當(dāng)存在熟悉與陌生個(gè)體時(shí)，更偏好后者。 

實(shí)驗(yàn)裝置由三個(gè)透明亞克力箱（20×40×22cm）組成，中間箱與兩側(cè)箱通過(guò)可移動(dòng)隔板連通。一側(cè)放置陌生小鼠（Strange Mouse, S1），另一側(cè)放置物體（Object, O）或第2只陌生鼠（S2）。通過(guò)記錄小鼠在各區(qū)域的停留時(shí)間、接觸次數(shù)等參數(shù)，計(jì)算其社交指數(shù)（Social Index）： 

三、實(shí)驗(yàn)流程：標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟

#1. 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 

- 動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)：實(shí)驗(yàn)前7天將小鼠置于12h/12h光暗循環(huán)環(huán)境，所有測(cè)試在暗周期（活躍期）進(jìn)行。 

- 陌生鼠選擇：使用同品系、同性別的年齡匹配小鼠（避免攻擊行為），提前隔離飼養(yǎng)24小時(shí)。 

- 裝置設(shè)置： 

- 三箱清潔：依次用肥皂水、70%乙醇擦拭，消除氣味殘留。 

- 物體選擇：固定塑料圓柱或金屬網(wǎng)格籠（直徑10cm）。 

- 環(huán)境控制：維持光照強(qiáng)度20-30勒克斯，背景噪音<50分貝。

#2. 實(shí)驗(yàn)階段 

階段一：自由探索（10分鐘） 

移除兩側(cè)隔板，讓受試小鼠在三箱內(nèi)自由活動(dòng)，適應(yīng)環(huán)境。 

階段二：社交偏好測(cè)試（10分鐘） 

- 一側(cè)箱放入陌生鼠（S1，置于金屬籠內(nèi)防止接觸），另一側(cè)放入物體（O）。 

- 記錄小鼠在S1區(qū)、O區(qū)的停留時(shí)間及鼻觸次數(shù)。 

階段三：社交新穎性測(cè)試（10分鐘） 

- 將物體（O）替換為第2只陌生鼠（S2），檢測(cè)小鼠對(duì)“熟悉（S1）”與“新穎（S2）”的選擇偏好。 

#3. 數(shù)據(jù)采集與分析 

- 關(guān)鍵參數(shù)： 

- 各區(qū)停留時(shí)間占比 

- 主動(dòng)接觸次數(shù)（鼻觸、跟隨） 

- 自我理毛次數(shù)（焦慮指標(biāo)） 

- 分析軟件：EthoVision、Visutrack等自動(dòng)追蹤系統(tǒng)，或人工盲法視頻分析。

四、注意事項(xiàng)：規(guī)避誤差的關(guān)鍵點(diǎn)

#1. 環(huán)境控制 

- 氣味干擾：每只小鼠測(cè)試后徹底清潔裝置，建議使用含1%醋酸溶液去除尿漬信息素。 

- 光照均一性：避免單側(cè)強(qiáng)光導(dǎo)致位置偏好。 

- 溫濕度穩(wěn)定：維持23±1℃，濕度50±10%。

#2. 動(dòng)物狀態(tài)管理 

- 避免應(yīng)激：抓取小鼠時(shí)使用隧道法，測(cè)試前30分鐘將動(dòng)物靜置在實(shí)驗(yàn)間。 

- 品系差異：C57BL/6小鼠社交活躍，而B(niǎo)ALB/c品系天性孤僻，需設(shè)置合理基線。 

- 年齡限制：優(yōu)選8-12周齡小鼠，老年鼠（>18月）可能出現(xiàn)自然社交衰退。 

#3. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化 

- 陌生鼠輪換：同一只陌生鼠zui多參與3次測(cè)試，防止“過(guò)度熟悉化”。 

- 性別匹配：雌性小鼠發(fā)情周期可能影響社交意愿，建議記錄動(dòng)情周期階段。 

- 時(shí)長(zhǎng)調(diào)整：對(duì)高焦慮品系（如BTBR），可縮短測(cè)試至5分鐘/階段。 

#4. 數(shù)據(jù)分析陷阱 

- 排除標(biāo)準(zhǔn)：總活動(dòng)距離<500cm的數(shù)據(jù)視為無(wú)效（可能因病疾或環(huán)境不適）。 

- 多參數(shù)交叉驗(yàn)證：結(jié)合接觸次數(shù)與停留時(shí)間綜合判斷，避免單一指標(biāo)偏差。 

- 批次效應(yīng)控制：同一實(shí)驗(yàn)的所有測(cè)試需在連續(xù)3天內(nèi)完成，減少環(huán)境波動(dòng)影響。 

五、技術(shù)延伸：從傳統(tǒng)到智能 

隨著技術(shù)進(jìn)步，三箱實(shí)驗(yàn)正與新型工具結(jié)合： 

- 無(wú)線神經(jīng)記錄：同步檢測(cè)前額葉皮層神經(jīng)元活動(dòng)，關(guān)聯(lián)社交行為與神經(jīng)編碼。 

- 深度學(xué)習(xí)算法：通過(guò)Visutrack實(shí)現(xiàn)接觸行為的自動(dòng)識(shí)別，準(zhǔn)確率>95%。 

- 多模態(tài)刺激：加入氣味擴(kuò)散裝置，研究嗅覺(jué)在社交決策中的作用。 

三箱社交實(shí)驗(yàn)以其簡(jiǎn)潔的設(shè)計(jì)和豐富的可拓展性，成為解析社交行為神經(jīng)機(jī)制的利器。研究者需牢記：標(biāo)準(zhǔn)化操作是數(shù)據(jù)可靠性的基石，而多維度的參數(shù)分析則能深度揭示行為背后的生物學(xué)意義。未來(lái)，該范式與基因編輯、光遺傳等技術(shù)的融合，必將為精神病疾研究與療治開(kāi)辟新路徑。 

動(dòng)物行為分析軟件：

VisuTrack軟件

SuperMaze軟件

FishTrack斑馬魚(yú)分析軟件

動(dòng)物行為儀器：

自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射（PPI）、跑步機(jī)、各類經(jīng)典迷宮等

動(dòng)物抓撓分析儀、動(dòng)物震顫行為分析儀、動(dòng)物捕食行為分析儀

動(dòng)物主動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物被動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物自由步態(tài)分析（內(nèi)測(cè)中）

睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉(zhuǎn)棒疲勞儀、鼠尾光照測(cè)痛儀等

神經(jīng)電生理：

光遺傳、無(wú)線光遺傳

光纖記錄系統(tǒng)（單通道、多通道）

電生理信號(hào)采集系統(tǒng)（腦電、肌電等）

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