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新奇抑制攝食實驗(NSFT):評估焦慮與抑郁行為的經(jīng)典范式

一、概述
新奇抑制攝食試驗(Novelty-Suppressed Feeding Test, NSFT)是一種廣泛應用于神經(jīng)科學和藥理學研究的行為學范式,主要用于評估嚙齒類動物(如大小鼠)的焦慮樣行為和抑郁相關癥狀。該實驗通過測量動物在陌生環(huán)境中接近和進食食物的潛伏期,反映其對壓力的敏感性及興趣缺失程度。NSFT因其操作簡便、結(jié)果直觀的特點,已成為抗焦慮藥和抗抑郁藥療效檢測之一。





二、實驗原理
NSFT的核心原理基于“沖突行為”模型:動物在饑餓狀態(tài)下,面對陌生環(huán)境時會產(chǎn)生趨避沖突——既渴望進食,又因環(huán)境壓力產(chǎn)生回避行為。

  1. 焦慮評估:實驗通過禁食增加動物對食物的需求,同時將食物置于開放式陌生環(huán)境(如明亮敞箱)的中心,形成壓力源。動物接近食物的潛伏期越長,表明其焦慮水平越高。

  2. 藥wu評價:抗焦慮藥wu可顯著縮短潛伏期,而抑郁模型動物因興趣缺乏和食欲減退,潛伏期明顯延長。



三、實驗操作步驟

1. 實驗前準備

  • 動物適應:將小鼠/大鼠單獨飼養(yǎng)1-2周,使其適應實驗環(huán)境,減少社會隔離以外的應激干擾。

  • 禁食處理:實驗前24小時禁食(不禁水),以激發(fā)攝食動機,但需避免超過48小時,以防過度饑餓引發(fā)異常行為。

  • 裝置設置:使用方形敞箱(推薦尺寸42 cm×31 cm×20 cm),中心放置單顆食丸(如標準飼料顆粒或高適口性食物)。環(huán)境需保持明亮(約500 lux),與家籠形成鮮明對比以增強壓力感。

  • 可采用[曠場實驗視頻分析系統(tǒng),XR-XZ301,上海欣軟]

2. 測試流程

  1. 將動物背對食丸置于敞箱角落,避免直接接觸食物引發(fā)探索偏差。

  2. 啟動記錄系統(tǒng)(如VisuTrack動物行為分析軟件),開始計時。

  3. 觀察20分鐘,記錄以下關鍵事件:

    • 攝食潛伏期:從放入動物到首ci咬食的時間(秒)。

    • 接近次數(shù):每分鐘動物靠近食物(距離<2 cm)的次數(shù)。

    • 嗅探/觸碰次數(shù):動物接觸但不進食的行為頻率。

3. 實驗后處理

  • 測試結(jié)束后,將動物放回家籠并提供食物,觀察5分鐘內(nèi)進食量以確認饑餓狀態(tài)。

  • 清潔實驗裝置,避免氣味殘留影響后續(xù)結(jié)果。



四、評估指標與數(shù)據(jù)分析


  • 核心指標

    1. 攝食潛伏期:直接反映焦慮水平,潛伏期越長,焦慮程度越高。

    2. 行為頻率:接近、嗅探次數(shù)可輔助評估動物的探索動機與決策猶豫。

  • 軟件支持:推薦使用VisuTrack等自動化系統(tǒng),通過視頻追蹤技術減少人為誤差,確保數(shù)據(jù)客觀性。



五、注意事項與優(yōu)化建議

  1. 禁食時間控制:禁食24小時為常用標準,但需根據(jù)動物品系調(diào)整。C57BL/6小鼠可能需縮短至18小時,而SD大鼠可耐受更長時間。

  2. 食物選擇:優(yōu)先使用高適口性食丸(如巧克力顆粒),或在家籠預適應食丸3天以減少新食物排斥。

  3. 性別差異:雌性動物因發(fā)情周期影響攝食穩(wěn)定性,建議記錄發(fā)情階段或選擇雄性進行初篩。

  4. 環(huán)境干擾:保持實驗室安靜(噪音<50 dB),避免人員走動或突發(fā)聲響干擾行為。

  5. 晝夜節(jié)律:測試時間需與動物活動周期一致(如夜行性小鼠應在暗周期進行)。


參考文獻

1.Wu M, Li A, Guo Y, Cao F, You S, Cao J, Mi W, Tong L. GABAergic neurons in the nucleus accumbens core mediate the antidepressant effects of sevoflurane. Eur J Pharmacol. 2023 May 5;946:175627.

2.Melas PA, Wirf M, André H, Jayaram-Lindstr?m N, Mathé AA, Steensland P. The monoamine stabilizer OSU6162 has anxiolytic-like properties and reduces voluntary alcohol intake in a genetic rat model of depression. Sci Rep. 2021 Jun 4;11(1):11856.

3.Francois M, Canal Delgado I, Shargorodsky N, Leu CS, Zeltser L. Assessing the effects of stress on feeding behaviors in laboratory mice. Elife. 2022 Feb 15;11:e70271. 

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